地质学研究中经常会遇到在拍摄大型的样品或者多行、列的矿物样品时,需要依靠电动平移台移动样品,对整个样品进行平铺扫描、多次拍摄,再进行后期的处理的情况。由于精确性的原因,往往图像和图像之间存在位移或者重叠。这时候就需要对图片进行拼接,以获得完整图像。
图像拼接大概可以分为以下2种情况:
图片命名有规律,且图片之间存在重叠。
图片命名无规律,且图片之间存在重叠。
图片有规律重叠是最常见的情况,特别是在CL电镜下平铺扫描时,每张图片在x、y方向都可能有部分的重叠,且图片按照顺序命名与排列。
2张图片拼接
对于有重叠的两张图片,如下图所示:

图片拼接方法:
Files -> Open,打开需要拼接的2张图片
Plugins -> Stitching -> Pixelwise Stitching of Images

弹出窗口:

选择需要拼合的2张图片,点击确定,在弹出的新窗口注意以下参数:
Fusion methods:可以选择不同的算法进行图像拼合,一般选择线性即可,若效果不好再考虑其他方法。
Subpixel accuracy:如果勾选,可以提高拼接的正确率,但会增加计算时间。
Registration channel image:选择拼接时参照的channel。如果是RGB图片的拼接,需要选择最好的Channel来进行拼接。
该插件可以自动探测图片的重叠区域,并进行拼接,但由于CL照片一般在右下角普遍会存在比例尺影响拼合,因此可以使用矩形框选工具在2张图片中各自框出特征重合区域,然后再进行拼接。

拼接结果:

3张及以上重叠图片拼接
对于有重叠的3张及以上图片,首先需要准备好图片,将按照扫描顺序进行命名,例如:样品名_1.jpg,样品名_2.jpg,以此类推。

图片拼接方法:Plugins -> Stitching -> Grid/Collection Stiching
在弹出的窗口中注意以下参数:
Type与Order:根据样品照片的扫描顺序确定使用何种拼接类型以及拼接方向

选择拼接类型与方向之后,在新的窗口注意以下参数:
Grid size x与Grid size y:例如样品图片一共有3行1列,就在x与y中分别输入3与1
Dictionary:选择存放样品照片的文件夹
First file index:样品照片的命名是从什么数字开始的,该插件会按照数字顺序拼接图片
File name for titles:样品文件名,记得带后缀名,变化的数字用{i}表示,例如样品名称分别为1.jpg,2.jpg,3.jpg,则命名为{i}.jpg

点击OK插件会自动开始拼接,拼接效果如下:

最后主界面File --> Save,选择保存格式即可保存拼接后的照片

引用
Preibisch, S., Saalfeld, S., & Tomancak, P. (2009). Globally optimal stitching of tiled 3D microscopic image acquisitions. Bioinformatics, 25(11), 1463–1465. doi:10.1093/bioinformatics/btp184